液氮儲罐細胞冷凍以及注意哪些問(wèn)題

<一>、液氮儲罐細胞冷凍
液氮儲罐細胞凍存是細胞生存的重要要領(lǐng)之一。使用凍存技能將細胞置于-196~C液氮中低溫生存，可以使細胞臨時(shí)離開(kāi)生長(cháng)狀態(tài)而將其細胞特性生存起來(lái)，如許在的時(shí)間再蘇醒細胞用于實(shí)行。并且適度地生存肯定量的細胞，可以防備因正在造就的細胞被污染或其他不測變亂而使細胞丟種，起到了細胞保種的作用。除此之外，還可以使用細胞凍存的情勢來(lái)購置、寄贈、互換和運送某些細胞。細胞凍存時(shí)向造就基中參加掩護劑——終濃度5%~15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO)，可使溶液冰點(diǎn)低落，加之在遲鈍凍結條件下，細胞內水分透出，淘汰了冰晶形成，從而制止細胞毀傷。尺度冷凍速率開(kāi)始為-1到-2℃/min，當溫度低于-25℃時(shí)可加快，到-80℃之后可直接投入液氮內(-196℃)。
現在常用的掩護劑為(DMSO)，它們對細胞分子量小，溶解度大，易穿透細胞。
實(shí)行質(zhì)料
儀器：液氮儲罐、凍存管(塑料螺口凍存管或安瓿瓶)、離心管、吸管、離心機等
試劑：0.25%胰酶、造就基、含掩護劑的造就基(即凍存液)
附：凍存液配制：造就基參加甘油或，使其終濃度達5-20%。掩護劑的種類(lèi)和用量視差別細胞而差別。配好后4℃下生存。
在生產(chǎn)過(guò)程中，由于換熱器管板受水分沖刷、氣蝕和微量化學(xué)介質(zhì)的腐蝕，管板焊縫處經(jīng)常出現滲漏，導致水和化工材料出現混合，生產(chǎn)工藝溫度難以控制，致使生成其它產(chǎn)品，嚴重影響產(chǎn)品質(zhì)量，降低產(chǎn)品等級。冷凝器管板焊縫滲漏后，企業(yè)通常利用傳統補焊的方法進(jìn)行，管板內部易產(chǎn)生內應力，致使其它換熱器出現滲漏，檢驗設備情況，反復補焊、實(shí)驗，2～4人需要幾天時(shí)間才能完成，使用幾個(gè)月后管板焊縫再次出現腐蝕，給企業(yè)帶來(lái)人力、物力、財力的浪費，生產(chǎn)成本的增加。
<二>、使用液氮儲罐需要注意些哪些問(wèn)題
LN2儲罐是儲存液態(tài)氮氣的壓力容器，為了滿(mǎn)足運輸的條件，一般液氮儲罐都做了防震設計。液氮儲罐除了可以靜置貯存以外，還可以在充裝液氮的狀態(tài)下，用做運輸使用。但是要特別注意避免劇烈的碰撞和震動(dòng)，因為液氮儲罐如果在高溫高壓，或者強烈撞擊下是有可能會(huì )發(fā)生的。那么現在跟大家說(shuō)一下在使用液氮儲罐過(guò)程中，需要注意的事項。
一般在使用液氮儲罐時(shí)，要先了解液氮儲罐的相關(guān)使用知識。當設備達到的使用年限時(shí)，需要及時(shí)處理新，即便還沒(méi)有超過(guò)保質(zhì)期，設備也有可能老化，從而導致使用效果不好，所以還需要大家定期地對液氮儲罐做好檢查。
然后還有液氮儲罐的清潔問(wèn)題，液氮儲罐需要在一個(gè)無(wú)脂無(wú)油的地方使用，如果沒(méi)有做到的話(huà)，也會(huì )造成不好的使用效果。
另外要注意：液氮儲罐在充填液氮時(shí)，先是要檢查外殼是否有凹陷，真空的排氣口是否完好。若被碰壞，真空度就會(huì )降低，嚴重時(shí)進(jìn)氣不能保溫，這樣罐上部會(huì )發(fā)生結霜的情況，液氮損耗變大，便失去了繼續使用的價(jià)值了。然后檢查液氮儲罐的內部，若有異物，及時(shí)取出，以防內膽被腐蝕。